宋海燕,尹友谊.邻苯二甲酸酐化学修饰对辣根过氧化物酶催化活性的影响[J].分子催化编辑部,2009,(5):
邻苯二甲酸酐化学修饰对辣根过氧化物酶催化活性的影响
Effects of Phthalic Anhydride Modification on Horseradis Peroxidase Properties
  
DOI:
中文关键词:  辣根过氧化物酶,邻苯二甲酸酐,催化活性
英文关键词:Horseradish peroxidase  Phthalic anhydride  Activity
基金项目:国家自然科学基金项目(No.40803038).广东省自然科学基金项目(No.06300843).
作者单位
宋海燕 华南师范大学化学与环境学院广州510006中山大学基因工程教育部重点实验室与化学系广州510275 
尹友谊 华南师范大学化学与环境学院广州510006 
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中文摘要:
      通过采用邻苯二甲酸酐(PA)对辣根过氧化物酶(HRP)的蛋白链进行修饰,研究了PA化学修饰对HRP的稳定性、催化活性、活性中心结构、酶对底物的亲合性和专一性等催化性质的影响.结果显示:酸性条件下(pH=3),4小时后PA HRP的催化活性比天然HRP提高了7.5%;碱性条件下(pH=10),4小时后PA HRP的催化活性比天然HRP提高了27%.PA HRP的Km值为8.16(mmol/L),小于天然HRP的Km值12.99(mmol/L),而PA HRP的kcat/Km值为7.86(104(L/mmol· min)大于天然HRP的kcat/Km的6.70(104(L/mmol· min).这些催化活性和动力学数据表明了PA HRP与天然HRP相比其稳定性、酶对底物的亲和性和专一性得到了提高.紫外-可见光谱、拉曼光谱数据显示:修饰剂PA改变了天然HRP血红素周围的微环境,对酶蛋白分子的活性中心结构并没有影响.差示光谱显示PA修饰剂可以提高酶对底物的亲和力.
英文摘要:
      
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